ນັກຄົ້ນຄວ້າຊາວໂຮນລັງສົມທົບ CRISPR ແລະ bioluminescence ໃນການທົດສອບທົດລອງສໍາລັບພະຍາດຕິດຕໍ່

ທາດໂປຼຕີນຈາກ nocturnal ທີ່ຖືກພັດທະນາໃຫມ່ສາມາດເລັ່ງແລະເຮັດໃຫ້ການວິນິດໄສຂອງພະຍາດໄວຣັສງ່າຍ, ອີງຕາມນັກຄົ້ນຄວ້າໃນປະເທດເນເທີແລນ.
ການສຶກສາຂອງພວກເຂົາ, ຈັດພີມມາໃນວັນພຸດໃນ ACS Publications, ອະທິບາຍວິທີການທີ່ລະອຽດອ່ອນ, ຂັ້ນຕອນດຽວສໍາລັບການວິເຄາະອາຊິດນິວເຄຼຍຂອງໄວຣັດຢ່າງໄວວາແລະຮູບລັກສະນະຂອງພວກມັນໂດຍໃຊ້ທາດໂປຼຕີນຈາກສີຟ້າຫຼືສີຂຽວທີ່ສົດໃສ.
ການກໍານົດຕົວຂອງເຊື້ອພະຍາດໂດຍການກວດສອບ fingerprints ອາຊິດ nucleic ຂອງເຂົາເຈົ້າແມ່ນຍຸດທະສາດທີ່ສໍາຄັນໃນການວິນິດໄສທາງດ້ານການຊ່ວຍ, ການຄົ້ນຄວ້າທາງຊີວະພາບ, ແລະການຕິດຕາມຄວາມປອດໄພຂອງອາຫານແລະສິ່ງແວດລ້ອມ.ການທົດສອບລະບົບຕ່ອງໂສ້ໂພລີເມີເມເຣດໃນປະລິມານທີ່ຖືກນໍາໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງ (PCR) ແມ່ນມີຄວາມອ່ອນໄຫວສູງ, ແຕ່ຕ້ອງການການກະກຽມຕົວຢ່າງທີ່ຊັບຊ້ອນຫຼືການຕີຄວາມຫມາຍຂອງຜົນໄດ້ຮັບ, ເຮັດໃຫ້ມັນບໍ່ສາມາດປະຕິບັດໄດ້ສໍາລັບບາງການຕັ້ງຄ່າການດູແລສຸຂະພາບຫຼືການກໍານົດຊັບພະຍາກອນຈໍາກັດ.
ກຸ່ມນີ້ມາຈາກປະເທດເນເທີແລນເປັນຜົນມາຈາກການຮ່ວມມືລະຫວ່າງນັກວິທະຍາສາດຈາກມະຫາວິທະຍາໄລແລະໂຮງຫມໍເພື່ອພັດທະນາວິທີການວິນິດໄສອາຊິດນິວຄລີອິກທີ່ໄວ, ເຄື່ອນທີ່ແລະງ່າຍຕໍ່ການນໍາໃຊ້ເຊິ່ງສາມາດນໍາໃຊ້ໄດ້ໃນຫຼາຍໆການຕັ້ງຄ່າ.
ພວກມັນໄດ້ຮັບການດົນໃຈໂດຍການກະພິບຂອງແມງວັນ, ແສງໄຟດອກໄຟ, ແລະດາວນ້ອຍໆຂອງແພລັລຕັນໃນນ້ຳ, ທັງໝົດແມ່ນຂັບເຄື່ອນໂດຍປະກົດການທີ່ເອີ້ນວ່າ bioluminescence.ຜົນກະທົບທີ່ສະຫວ່າງໃນຄວາມມືດນີ້ແມ່ນເກີດມາຈາກປະຕິກິລິຍາທາງເຄມີທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບທາດໂປຼຕີນຈາກ luciferase.ນັກວິທະຍາສາດໄດ້ລວມເອົາທາດໂປຼຕີນຈາກ luciferase ເຂົ້າໄປໃນເຊັນເຊີທີ່ປ່ອຍແສງເພື່ອອໍານວຍຄວາມສະດວກໃນການສັງເກດໃນເວລາທີ່ພວກເຂົາຊອກຫາເປົ້າຫມາຍ.ໃນຂະນະທີ່ນີ້ເຮັດໃຫ້ເຊັນເຊີເຫຼົ່ານີ້ເຫມາະສົມສໍາລັບການກວດຫາຈຸດດູແລ, ປະຈຸບັນພວກມັນຍັງຂາດຄວາມອ່ອນໄຫວສູງທີ່ຈໍາເປັນສໍາລັບການທົດສອບການວິນິດໄສທາງຄລີນິກ.ໃນຂະນະທີ່ວິທີການດັດແກ້ gene CRISPR ສາມາດສະຫນອງຄວາມສາມາດນີ້, ມັນຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີຫຼາຍຂັ້ນຕອນແລະອຸປະກອນພິເສດເພີ່ມເຕີມເພື່ອກວດພົບສັນຍານທີ່ອ່ອນແອທີ່ສາມາດມີຢູ່ໃນຕົວຢ່າງທີ່ສັບສົນ, ບໍ່ມີສຽງ.
ນັກຄົ້ນຄວ້າໄດ້ພົບເຫັນວິທີທີ່ຈະສົມທົບການເປັນທາດໂປຼຕີນທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບ CRISPR ກັບສັນຍານ bioluminescent ທີ່ສາມາດກວດພົບໄດ້ດ້ວຍກ້ອງຖ່າຍຮູບດິຈິຕອນງ່າຍດາຍ.ເພື່ອໃຫ້ແນ່ໃຈວ່າມີຕົວຢ່າງ RNA ຫຼື DNA ພຽງພໍສໍາລັບການວິເຄາະ, ນັກຄົ້ນຄວ້າໄດ້ປະຕິບັດການຂະຫຍາຍຂອງ recombinase polymerase (RPA), ເຕັກນິກງ່າຍໆທີ່ເຮັດວຽກຢູ່ໃນອຸນຫະພູມຄົງທີ່ປະມານ 100 ° F.ພວກເຂົາເຈົ້າໄດ້ພັດທະນາແພລະຕະຟອມໃຫມ່ທີ່ເອີ້ນວ່າ Luminescent Nucleic Acid Sensor (LUNAS), ເຊິ່ງສອງທາດໂປຼຕີນ CRISPR / Cas9 ແມ່ນສະເພາະສໍາລັບສ່ວນທີ່ຕິດຕໍ່ກັນຂອງເຊື້ອໄວຣັດ, ແຕ່ລະສ່ວນມີຊິ້ນສ່ວນ luciferase ເປັນເອກະລັກຕິດກັບພວກມັນຂ້າງເທິງ.
ໃນເວລາທີ່ genome ໄວຣັສສະເພາະທີ່ນັກສືບສວນກໍາລັງກວດສອບ, ສອງທາດໂປຼຕີນ CRISPR / Cas9 ຜູກມັດກັບລໍາດັບອາຊິດ nucleic ເປົ້າຫມາຍ;ພວກມັນຢູ່ໃນຄວາມໃກ້ຊິດ, ອະນຸຍາດໃຫ້ທາດໂປຼຕີນຈາກ luciferase intact ປະກອບແລະປ່ອຍແສງສີຟ້າໃນທີ່ປະທັບຂອງ substrate ເຄມີ..ເພື່ອຄິດໄລ່ substrate ທີ່ບໍລິໂພກໃນຂະບວນການນີ້, ນັກຄົ້ນຄວ້າໄດ້ນໍາໃຊ້ປະຕິກິລິຍາຄວບຄຸມທີ່ປ່ອຍແສງສີຂຽວ.ທໍ່ທີ່ປ່ຽນສີຈາກສີຂຽວເປັນສີຟ້າສະແດງຜົນໃນທາງບວກ.
ນັກຄົ້ນຄວ້າໄດ້ທົດສອບເວທີຂອງພວກເຂົາໂດຍການພັດທະນາ RPA-LUNAS assay, ເຊິ່ງກວດພົບSARS-CoV-2 RNAໂດຍບໍ່ມີການໂດດດ່ຽວ RNA ທີ່ຫນ້າເບື່ອ, ແລະສະແດງໃຫ້ເຫັນການປະຕິບັດການວິນິດໄສຂອງມັນຢູ່ໃນຕົວຢ່າງ swab nasopharyngeal ຈາກCOVID-19ຄົນ​ເຈັບ.RPA-LUNAS ໄດ້ກວດພົບ SARS-CoV-2 ຢ່າງສຳເລັດຜົນພາຍໃນ 20 ນາທີໃນຕົວຢ່າງທີ່ມີການໂຫຼດໄວຣັສ RNA ຕໍ່າເຖິງ 200 ສຳເນົາ/μL.
ນັກຄົ້ນຄວ້າເຊື່ອວ່າການວິເຄາະຂອງພວກເຂົາສາມາດກວດພົບໄວຣັດອື່ນໆຫຼາຍຊະນິດໄດ້ຢ່າງງ່າຍດາຍແລະມີປະສິດທິພາບ.ພວກເຂົາຂຽນວ່າ "RPA-LUNAS ເປັນທີ່ດຶງດູດສໍາລັບການທົດສອບການຕິດເຊື້ອໃນຈຸດທີ່ການດູແລ," ເຂົາເຈົ້າຂຽນ.